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跨膜細(xì)胞電阻儀的工作原理介紹

更新時(shí)間:2026-05-01點(diǎn)擊次數(shù):438
跨膜細(xì)胞電阻儀(TEER儀)核心原理是交流阻抗法+歐姆定律:通過(guò)向Transwell上下腔施加低頻微交流電,測(cè)量離子流穿過(guò)細(xì)胞單層的阻力,換算為T(mén)EER值(Ω?cm²),無(wú)創(chuàng)評(píng)估細(xì)胞屏障完整性與緊密連接功能。
 
一、基本概念與測(cè)量對(duì)象
 
測(cè)量對(duì)象:在Transwell多孔膜上形成的上皮/內(nèi)皮細(xì)胞單層(如腸道、血腦屏障模型)。
 
核心指標(biāo):
 
TEER(跨膜電阻):反映細(xì)胞間緊密連接的致密程度,值越高屏障越強(qiáng)。
 
PD(跨膜電位):細(xì)胞兩側(cè)電位差,輔助判斷細(xì)胞極性與活性。
 
二、核心工作原理(交流阻抗測(cè)量)
 
系統(tǒng)構(gòu)成
 
主機(jī):產(chǎn)生10μA恒定低頻交流(1kHz/12.5Hz),避免電極極化與細(xì)胞損傷。
 
四芯電極(雙極):
 
一對(duì)電流電極:注入恒定交流電流,穿過(guò)細(xì)胞單層。
 
一對(duì)電壓電極:測(cè)量跨細(xì)胞層的電壓降(ΔV)。
 
物理原理(歐姆定律)
 
恒定電流I(10μA)→穿過(guò)細(xì)胞單層→測(cè)得電壓ΔV→計(jì)算電阻R=ΔV/I。
 
細(xì)胞完整:緊密連接封閉,離子(Na?/Cl?)難透過(guò)→R高。
 
細(xì)胞破損:連接松散/凋亡,離子易透過(guò)→R低。
 
交流技術(shù)關(guān)鍵(為何不用直流)
 
防極化:交流正負(fù)極快速反轉(zhuǎn),避免電極表面金屬沉積與電荷累積。
 
護(hù)細(xì)胞:低電流/低電壓(μA級(jí)/mV級(jí)),無(wú)電化學(xué)損傷。
 
抗干擾:低頻(1kHz)避開(kāi)膜電容干擾,讀數(shù)穩(wěn)定。
 
三、TEER值換算(扣除背景)
 
總電阻(R總)=細(xì)胞單層電阻(R細(xì)胞)+空白膜電阻(R空白)。
 
公式:TEER(Ω?cm²)=(R總−R空白)×有效膜面積。
 
示例:R總=1500Ω,R空白=300Ω,膜面積=0.33cm²→TEER=(1500−300)×0.33=396Ω·cm²。
 
四、測(cè)量流程(簡(jiǎn)化)
 
校準(zhǔn):用空白Transwell(無(wú)細(xì)胞)測(cè)R空白,保存為背景。
 
測(cè)量:電極分別插入上腔(細(xì)胞側(cè))與下腔(基底側(cè)),確保不碰膜。
 
讀數(shù):穩(wěn)定后記錄R總,儀器自動(dòng)計(jì)算TEER值。
 
對(duì)比:實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組TEER變化,評(píng)估藥物/炎癥對(duì)屏障的影響。
 
五、核心應(yīng)用邏輯
 
屏障功能評(píng)估:腸道/血腦屏障模型成熟度(TEER通常500–2000Ω·cm²)。
 
藥物篩選:藥物毒性(TEER下降)或增強(qiáng)屏障(TEER上升)效果。
 
病理機(jī)制:炎癥因子、病原體對(duì)細(xì)胞連接的破壞作用。
 
六、關(guān)鍵特點(diǎn)
 
無(wú)創(chuàng)實(shí)時(shí):無(wú)需染色/標(biāo)記,可動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)數(shù)天。
 
精準(zhǔn)穩(wěn)定:分辨率1Ω,自動(dòng)均值處理,數(shù)據(jù)可靠。
 
適配性強(qiáng):兼容6/12/24/96孔Transwell與尤斯室。
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